Résonance des plasmons de surface pour une analyse haut débit
Détection haute performance à haut débit des interactions moléculaires
La résonance des plasmons de surface (RPS) est une technologie de détection basée sur l'optique sans marqueur pour surveiller en temps réel les interactions par liaison entre deux molécules ou plus. Le débit, la flexibilité et la sensibilité de la plateforme RPS donne aux chercheurs le potentiel de caractériser les interactions biomoléculaires dans n'importe quelle étude de liaison. Une large gamme de molécules peut être étudiée, des ions, fragments et petites molécules aux protéines et aux virus. La technologie RPS donne des données biophysiques comme l’affinité, la cinétique et la thermodynamique.
Les biocapteurs analytiques basés sur RPS sont des outils puissants pour caractériser les interactions moléculaires. La combinaison de trois éléments (le détecteur, la surface du capteur et le système de livraison des échantillons) est critique pour la performance de l’expérience.
Détection optique en temps réel et sans marqueur
Des interactions par liaison entre une molécule sur la surface du capteur (ligand) et son/ses partenaire(s) de liaison en solution (analyte) sont surveillées en temps réel par RPS.
La RPS utilise un type de réflexion interne totale et cause une réduction de l’intensité lumineuse réfléchie à un angle spécifique de la face en verre de la surface du capteur. Quand les molécules se lient, l’indice de réfraction proche de la surface change, entraînant une modification de l’angle de l’intensité minimale réfléchie. Le changement d’angle est proportionnel à la masse de matériaux liés. La sortie typique est un sensorgramme qui surveille le changement d'angle comme une fonction du temps.
RPS + détection
Le Sierra SPR-24/32 Pro emploie la détection par imagerie par résonance des plasmons de surface appelée SPR+. SPR+ permet l’imagerie des réseaux 2D avec un niveau de sensibilité à la détection normalement limité aux réseaux linéaires. SPR+ dérive sa sensibilité élevée en combinant l’imagerie RPS traditionnelle à un faisceau laser haute intensité et un balayage optique à vitesse élevée. L'intensité de la source lumineuse permet l’utilisation de caméras ultra-rapides qui à leur tour permettent de faire davantage de mesures par résonance par balayage. Le résultat net est une réduction du bruit de la RMS et une amélioration de la précision pendant la mesure de petits changements de réaction.
Des capteurs conviviaux réduisent la variabilité du dosage
Les capteurs utilisés dans les systèmes Sierra SPR sont des prismes plaqués or montés sur des cartouches faciles à manipuler. La conception simplifie l’installation et supprime le risque d'une variation du dosage liée à l’utilisateur. La surface en or qui est requise pour RPS peut être revêtue avec une monocouche auto-assemblée pour bloquer la liaison non-spécifique de protéines et pour simplifier la fixation des molécules à la surface. L'éventail de plus en plus large des chimies de liaison de surface élargit l’utilité des biocapteurs analytiques pour une vaste gamme d'applications.
Nouvelle microfluidique de flux continu
Grâce à la distribution d'échantillons à la surface du capteur via un dispositif microfluidique de flux continu, les mesures de liaison sont ultra-précises. Pour la distribution d'échantillons reproductibles, le système Sierra SPR-24/32 Pro utilise la technologie d’isolation hydrodynamique (HI) propriétaire. HI est une méthode de présentation de petits volumes de fluide, mais néanmoins très discrets, à des endroits isolés sur une surface 2D contenue dans une cellule de débit sous un flux laminaire. La gestion du fluide spécifique à l’emplacement dans la cellule de débit est simplifiée par la combinaison de composants de recentrage hydrodynamique avec une évacuation spécifique au site. Le processus ne requiert pas l’utilisation de barrières physiques dans la cellule de débit ou les valves mécaniques pour contrôler les trajets du mouvement du fluide, permettant ainsi un multiplexage à haut débit ou la construction de réseaux 2D avec des éléments de détection pouvant être traités individuellement.
Applications de la résonance des plasmons de surface
La gamme Sierra SPR Pro est un biocapteur analytique à haute performance et haut débit pour une caractérisation, en temps réel et sans marqueur, des interactions moléculaires sur toute la plage des applications.
Examen de la liaison dépendant de l’état à l’aide de l’injection de trame
L’examen classique des demandes de liaison en fonction de l’état nécessite des coûts élevés de réactif ainsi qu’un long temps de fonctionnement. L'injection de trame permet d'économiser du temps et de l’argent avec une faible consommation d'échantillons.
Comme influencer la densité du ligand à l’aide du couplage d'amine
Le point crucial est de trouver le niveau d'immobilisation idéal pour obtenir des mesures cinétiques optimales. Nous examinons ici les paramètres d’influence sur différentes cibles données à titre d'exemple.
Dépistage et caractérisation d’une petite liaison de molécules à des cibles protéiniques
L'analyse en temps réel sans marqueur (RT-LF) par détection RPS est un outil puissant pour la caractérisation biophysique de petites molécules thérapeutiques et de médicaments potentiels.
Dépistage et caractérisation des biothérapeutiques
L'analyse en temps réel sans marqueur (RT-LF) par détection RPS est un outil puissant pour la caractérisation biophysique de produits thérapeutiques à base de protéine.
Tackling Challenging Targets with High-Throughput Biophysical Screening at Novartis
Learn in this note how multiplexing, automation and automated data analysis with Genedata Screener take SPR to the next level in this real-life example.
Bibliothèque sur la résonance des plasmons de surface
For Research Use Only. Not for use in clinical diagnostic procedures.