Поверхностный плазмонный резонанс для высокопроизводительного анализа
Высокотехнологичное и высокопроизводительное обнаружение молекулярных взаимодействий
Поверхностный плазмонный резонанс (ППР) – это оптическая безмаркерная технология обнаружения, используемая для мониторинга в реальном времени связывающего взаимодействия двух и более молекул. Высокая производительность, гибкость и чувствительность платформы ППР дает ученым потенциальную возможность для характеризации биомолекулярных взаимодействий в любом исследовании связывания. Изучать можно широкий ряд молекул, от ионов, фрагментов и малых молекул до белков и вирусов. Технология ППР позволяет получать биофизические данные, такие как подобие, кинетика и термодинамика.
Аналитические биосенсоры на базе ППР представляют собой мощный инструмент для характеризации молекулярных взаимодействий. Сочетание трех элементов – детектора, поверхности сенсора и системы доставки образцов – имеет критическое значение для успеха эксперимента.
Оптическое безмаркерное обнаружение в реальном времени
Связывающие взаимодействия между молекулой на поверхности сенсора (лигандом) и партнером(ами) по связыванию в растворе (анализируемой смеси) можно наблюдать в реальном времени при помощи ППР.
ППР использует эффект полного внутреннего отражения, вызывая уменьшение интенсивности света, отраженного под определенным углом от стеклянной поверхности сенсора. После связывания молекул коэффициент отражения вблизи поверхности изменяется, сдвигая угол минимальной интенсивности отраженного излучения. Изменение угла пропорционально массе связанного материала. На выходе, как правило, получают сенсограмму, которая отслеживает изменение угла в виде функции времени.
Система обнаружения ППР+
Sierra SPR-24/32 Pro использует технологию поверхностного плазмонного резонанса под названием SPR+. SPR+ позволяет визуализировать 2-мерные массивы при уровне чувствительности обнаружения, ранее достижимой только на линейных массивах. Высокая чувствительность SPR+ достигается за счет сочетания традиционной визуализации ППР с лазерным излучением высокой интенсивности и скоростным оптическим сканированием. Интенсивность источника излучения допускает использование высокоскоростных камер, что в свою очередь позволяет выполнять больше измерений резонанса за одной сканирование. Как результат: уменьшение среднеквадратичного значения шума и увеличение точности при измерении малых изменений реакции.
Удобные в использовании сенсоры снижают вариативность результатов
В качестве сенсоров в ППР-системах Sierra используются позолоченные призмы, установленные в удобных картриджах. Такое исполнение упрощает установку и исключает отклонения результатов при работе разных пользователей. Позолоченная поверхность, необходимая для ППР, может быть покрыта самособирающимся монослоем для блокирования неспецифического связывания белков и упрощения прикрепления молекул к поверхности. Растущий ассортимент поверхностных химических компонентов значительно расширяет возможности применения аналитических биосенсоров.
Инновационные непрерывнопоточные микрофлюидные решения
Доставка образца на поверхность сенсора при помощи непрерывнопоточного микрофлюидного модуля гарантирует высочайшую точность при измерении связывания. Для обеспечения воспроизводимости доставки образца система Sierra SPR-24/32 Pro использует специальную технологию гидродинамической изоляции (HI). Последняя служит для визуализации от малых, но высокодискретных объемов жидкости до изолированных локаций на двухмерной поверхности, находящейся внутри проточной кюветы под ламинарным потоком. Сайт-специфическая адресация жидкости внутри проточной кюветы упрощается за счет комбинации компонентов гидродинамического фокусирования с сайт-специфическим удалением. Рабочий процесс не требует использования физических барьеров внутри проточной кюветы или механических клапанов для контроля путей движения жидкости, обеспечивая таким образом мультиплексирование или создание двухмерных массивов с индивидуально адресуемыми точками обнаружения.
Области применения поверхностного плазмонного резонанса
Sierra SPR Pro – это высокотехнологичный и высокопроизводительный аналитический биодатчик для безмаркерной характеризации молекулярных взаимодействий в реальном времени для самых разных сфер применения.
Исследование условно-зависимого связывания с помощью многоточечной инъекции
Традиционное исследование условно-зависимого связывания требует дорогостоящих реагентов и много времени на выполнение. Многоточечная инъекция экономит деньги и время при одновременно малом расходе проб.
Как изменить плотность лиганда посредством иммобилизации по аминогруппе
Поиск идеального уровня иммобилизации для получения оптимальных кинетических измерений имеет большое значение. Здесь мы изучаем параметры влияния на разных мишенях.
Скрининг и характеризация связывания малых молекул с белками-мишенями
Безмаркерный анализ в реальном времени на базе ППР служит мощным инструментом для биофизической характеризации низкомолекулярных препаратов и препаратов-кандидатов.
Скрининг и характеризация биотерапевтических средств
Безмаркерный анализ в реальном времени на базе ППР служит мощным инструментом для биофизической характеризации белковых терапевтических средств.
Tackling Challenging Targets with High-Throughput Biophysical Screening at Novartis
Learn in this note how multiplexing, automation and automated data analysis with Genedata Screener take SPR to the next level in this real-life example.
Литература по поверхностному плазмонному резонансу
For Research Use Only. Not for use in clinical diagnostic procedures.