表面等离子共振( SPR )是一种基于光学、非标记的检测技术,可用于实时检测两个或更多分子间的结合作用。SPR 仪器平台的通量、灵活性及灵敏度,能够让研究者在结合研究中对生物分子的相互作用进行表征,并且可广泛的适用于不同分子,如离子、分子片段、小分子、蛋白质、病毒等。SPR 技术可以提供诸如亲和力、动力学、热力学等生物物理数据。
基于 SPR 的生物传感器是分子间相互作用表征的重要工具。而影响实验结果的三个要素,则包含了检测器、传感器表面和样品递送系统。
SPR 可以实时检测传感器表面的分子(配体)及其溶液中的结合配偶体(分析物)之间的结合作用。
SPR 的原理是基于全反射,在光以特定角度在传感器玻璃表面反射时,引起光强度的衰减。随着分子的结合,表面折射率的变化,引起最小反射强度角度的变化。角度的变化与结合物质的质量成比例关系。所得结果可以用记录角度随时间变化的传感图线表示。
Sierra SPR®-24/32 Pro 采用了表面等离子共振成像检测技术,该技术也称为 SPR+。SPR+ 可以对二维阵列进行成像,突破以往线性阵列能够达到的检测灵敏度。其通过结合传统的 SPR 成像技术,高强度激光以及高速光学扫描,达到卓越的高灵敏度。在光源强度下可以采用高速摄影,使得每个扫描下可以检测更多的共振信息。所带来的优势在于检测微小反应变化的时候,能够获得更低的 RMS 噪音,并且提高准确性。
Sierra SPR 系统采用的传感器为嵌在简便易用模块中的镀金棱镜。这种设计使得安装非常方便,降低了不同使用人员分析所带来的差异性。SPR 所需的金表面,可以通过自行组装的涂层来覆盖,从而阻止蛋白的非特异性结合,并且帮助分子结合到表面。表面也可连接不同化合物,从而扩宽分析传感器的应用。
通过连续流微流控技术,将样品递送至传感器表面,可以获得非常准确的结合作用测定结果。Sierra SPR®-24/32 Pro 系统采用专利的流体动力学隔离( HI )技术,可以达到高重复性的样品递送。HI 技术可以在层流状态下,将小体积的高度离散液体,通过流通池递送至二维平面上分散的检测点。而流通池内特定位置的液体可以通过合并流体动力学元件在特定位置排出。这个过程不需要在流通池内设置物理屏障或者机械阀就能控制液体流动路径,从而实现高通量多通道检测,或者在二维阵列上设置不同的单独检测分析点。
Sierra SPR® Pro 系列仪器拥有高性能、高通量的生物传感器,能够实时非标记的表征分子间相互作用,并且应用范围广泛。
独特 Frame 注射技术研究不同条件下的结合作用
传统方法研究不同条件下的结合作用,不但成本高,而且耗时。Frame 注射技术在低消耗样品的同时,可以节省成本和时间。
如何通过氨基偶联影响配体浓度
找到理想的固定条件对于获得适合的动力学参数测定非常重要。在此我们对不同的样品,试验了影响的因素。
与靶蛋白结合小分子的筛选表征
对于小分子药物及候选药物生物物理参数的表征,SPR 作为一种强有力的工具,能够提供实时非标记的分析。
生物药筛选及表征
对于蛋白药物生物物理参数的表征,SPR 作为一种强有力的工具,能够提供实时非标记的分析。
成功案例:诺华利用高通量生物物理筛选解决难题
在该应用报告中,您将了解 SPR 对于实际样品,是如何将集成多通道、自动化、数据自动处理的分析上升到一个新高度。
仅供研究使用。不适用于临床诊断程序。