样品(固体或液体)中多肽和寡核苷酸的含量在很多方面都很重要。对于多肽而言,传统的方法,如凯氏定氮、元素分析(EA)和氨基酸分析(AAA),需要在苛刻的条件下分解蛋白质,以确定蛋白质的含量。对于寡核苷酸,最广泛使用的定量技术之一是紫外(UV)光谱法。这种方法需要耗时的样品制备,而且由于消光系数的不确定性,该方法的准确性也会受到影响。
核磁共振(NMR)波谱具有固有定量性,在小分子分析中定量核磁共振(qNMR)已成功应用了几十年。对于像多肽和寡核苷酸这样的较大分子,在原生条件下,高级结构因素会造成严重谱线展宽,从而影响1H-NMR的定量。
本次网络研讨会将介绍在非原生条件(氘水:乙腈混合物)下分析多肽并在高温下记录 1H-NMR 数据的应用。对于寡核苷酸,使用 1H-NMR 是不可行的,因此数据将以 31P 作为 qNMR 的测定核。在两种模式(多肽和寡核苷酸)中,方法的验证采用了 USP 和 ICHQ2(R2) 在验证参数(如线性)和平台适用性方面的建议。
多肽和寡核苷酸的含量结果将与传统方法得出的含量结果进行比较。
举办时间:
2024 年 6 月 18 日,北京时间晚上 23:00
Joan Malmstrøm 博士,丹麦诺和诺德CMC分析支持及研发科学家
Victor Beaumont 博士,布鲁克BioSpin战略市场开发专员