PepSepTM カラム＆エミッター
超高感度、ハイスループット、かつ優れた最大限の再現性を実現
高速液体クロマトグラフィー（HPLC）に使用する逆相カラムはピーク分離能を決定する重要な構成要素です。なかでもプロテオミクスの世界では高精度分離こそが高品質な分析を導きます。
科学者、研究者、そして臨床医はHPLCおよび質量分析（MS）システムに堅牢性、スピード、および感度を求めています。彼らの要求は、クロマトグラフィー分離において最小限のメンテナンスで大規模なサンプル量に対応できるシステムを持つ場合にあてはまります。プロセスを最適化する鍵はカラムの選択から始まります。最適なカラムを使えば高いスループットと超高感度を維持しながら正確なデータを収集でき、かつ再現性の高い結果が得られます。
そこで重要になるのが、カラムおよびヒントです。
(a) 液体クロマトグラフィー（LC）とMSの橋渡し役
(b) ペプチドの保持／活性部位への結合
(c) クロマトグラフィーの分離能
omg OMx Podcast
Dr.Balyn Zaro が PepSep などについて語る omg OMx Podcast をぜひご視聴ください。
PepSepを使ったフロー
PepSepTM C18カラムは、スピード、再現性、および感度を重視するアカデミックおよびコアラボで御愛用いただいているカラムです。なぜならばこのカラムはねじ込むだけで簡単に取り付けおよび取り外しが可能なデザインしたからです。
その結果、カラム交換に費やす時間を減らし重要なことに費やす時間を増やせます。PepSepTM の消耗品とBruker ProteoScapeTM を搭載したtimsTOFシリーズを組み合わせることで、PASEF® の高速スキャンでデータを取得する能力が強化され、経験値が向上します。
" PepSepカラムの性能には本当に驚かされます。PepSepカラムは、驚くべきハイスループットなプロテオミクスを達成するために不可欠なものとなりました。
ブルカー timsTOF Pro質量分析計とシームレスに連携するPepSepカラムは、バックプレッシャーを最小限に抑えながら、より高いナノ流量で分析することを可能にします。これは分析時間の短縮とサンプルスループットの大幅な向上につながります。"
David Gómez-Varela, Ph.D., Division of Pharmacology and Toxicology, University of Vienna, Vienna, Austria
PepSep® Advanced: タンパク質とペプチドの一貫した高品質な分離のために設計されています。
最先端のプロテオミクスに最適な、優れた感度と分離能を実現する先進カラムです。
主な特徴
・業界トップクラスの感度：低濃度のペプチドでも最大限の信頼度で検出
・ピークシャープネスの向上：正確な分離により、データの明瞭性を向上
・包括的な同定：タンパク質およびペプチドの発見能力を拡大
・妥協のない堅牢性：最適化された流動力学と低背圧により、よりスムーズで高速な操作を実現
技術仕様
Part No.: 1919826
Dimensions: 25 cm x 75 µm x 1.5 µm
Stationary Phase: C18
Column type: reversed phase
Pore size: 100 Å (1.5 µm)
Surface area: 400 m²/g (1.5 µm)
Temperature limits: 60°C
Ultra-High-Pressure inlet (up to 1000 bar)
Patented nanoConnect® outlet
Flow rate: 100 - 500 nL/min
用途：シングルセルプロテオミクス、イムノペプチドミクス、一般プロテオミクス、血漿プロテオミクス、PTM ペプチド（リン酸化ペプチドなど）の分析
究極の感度とペプチドのカバレッジを高めるために開発されました
0.25、1、 4、 および16 ngのHeLaトリプシン消化物を、PepSep® Advancedカラム（25 cm × 75 µm × 1.5 µm）およびCompetitor Aカラム（エミッター一体型カラム、25 cm × 75 µm × 1.7 µm）に注入し、識別されたユニークなペプチドおよびタンパク質グループ。サンプルは、nanoElute® 2と接続したBruker timsTOF Ultra 2を用いて、dia-PASEF® 法で測定されました。データは DIA-NN 1.8.1 を使用して解析されました。
250 pg のサンプル量で 5000 以上のタンパク質グループ
22 分間のアクティブグラジエントを用いて、PepSep® Advanced カラム (25 cm x 75 µm x 1.5 µm) にさまざまな量の K562 を注入し、識別されたユニークなタンパク質グループ。サンプルは、nanoElute® 2と接続したBruker timsUltra AIPを用いて、dia-PASEF® 法で測定されました。データはDIA-NN 1.8.1を使用し、K562スペクトルライブラリに基づいて解析されました。
データの明瞭性を向上させる、正確な分離を実現します。
nanoElute® 2 および timsTOF Ultra に接続した PepSep® Advanced カラム (25 cm x 75 µm x 1.5 µm) において、22 分間のアクティブグラジエントを使用して、Biognosys iRT Kitのペプチド (注入量 1 µL、原液 1/300 希釈) の保持時間とピーク幅。
「新しい PepSep カラムは堅牢性が高く、再現性の高いクロマトグラフィーを常に実現しています。このカラムは、テーリングを伴わない、よりシャープで対称的なピークを生成し、結果として、同定率が 7～8% 向上しました。交換可能なエミッターの利便性と競争力のある価格も相まって、当コアファシリティの定番カラムとなっています。実質的にプラグアンドプレイです。」
Lynn Spruce, Technical Director, CHOP-Penn Proteomic Core Facility, Philadelphia, USA
PepSep® Classics：標準的なプロテオミクスワークフローのための汎用性の高いソリューション
日常的なプロテオミクス分析用に設計された、信頼性が高く汎用性の高いカラムです。
主な特徴
・堅牢な耐久性：長期間の使用でも安定した性能を発揮するように設計されています。
・処理能力の向上：迅速な分析に最適化されており、実験室の効率を向上させます。
・卓越した柔軟性：幅広い分離作業に簡単に対応します。
・コスト効率に優れたソリューション：魅力的な価格と、分離されたエミッターによる長寿命を実現しています。
技術仕様
Part No.: 各種、表をご覧ください
Dimensions: 各種、表をご覧ください
Stationary Phase: C18
Column type: reversed phase
Pore size: 100 Å (1.5 µm) or 120 Å (1.9 µm)
Surface area: 400 m²/g (1.5 µm) or 300 m²/g (1.9 µm)
Temperature limits: 60°C
Ultra-High-Pressure inlet (up to 1000 bar)
Patented nanoConnect® outlet
Flow rate: 各種、表をご覧ください
用途: 各種、表をご覧ください
さまざまな長さ、内径、粒子サイズを備えた幅広いカラムからお選びいただけます。
| Benefit | Application | Part No. | Description | Flow rate [nL/min] |
|---|---|---|---|---|
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893627 | 25 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 200 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893625 | 15 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 750 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1893626 | 15 cm x 50 µm x 1.5 µm | 50 - 300 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics, High Sensitivity | 1895803 | 10 cm x 75 µm x 1.5 µm | 150 - 1000 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893477 | 25 cm x 75 µm x 1.9 µm | 100 - 600 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893473 | 15 cm x 75 µm x 1.9 µm | 200 - 1000 |
| Sensitivity | Single Cell Proteomics, Immunopeptidomics, General Proteomics | 1893472 | 10 cm x 75 µm x 1.9 µm | 150 - 1500 |
| Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1895838 | 40 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1000 |
| Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893479 | 25 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
| Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893471 | 15 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 2000 |
| Optimization | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility | 1893474 | 15 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 1500 |
| Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1893470 | 8 cm x 150 µm x 1.5 µm | 500 - 5000 |
| Throughput | General Proteomics, Plasma Proteomics, Mixed Samples, Gradient Versatility, High-Throughput | 1895619 | 4 cm x 150 µm x 1.9 µm | 500 - 5000 |
PepSep® Classic 50 cm x 75 μm x 1.5 μm
PepSep® Classic 50 cm x 75 μm x 1.5 μm スペクトルライブラリー作成に不可欠なロンググラジエント用に設計されています。スペクトルライブラリーは、プロテオミクス、特に質量分析ベースのプロテオミクスにおいて重要な役割を果たします。
PepSep® Classic 5 cm x 150 μm x 1.5 μm:
A Short Column for High-Throughput Proteomics
ハイスループットなプロテオミクス用に設計されたPepSep® Classic（5 cm x 150 µm x 1.5 µm）は、15分未満のグラジエントが可能です。このため、臨床サンプルの分析や薬剤ライブラリーのスクリーニングなど、スピードが要求されるアプリケーションに最適です。
PepSep® Classic 25 cm x 75 μm x 1.5 μm:
Enhance Sensitivity
適切な正しいカラムの選択は容易なことではありません。タンパク質やペプチドの同定数を上げるためには、カラムを選択する決断があります。PepSep® Classic（25cm x 75μm x 1.5μm）C18 HPLCカラムは、ルーチン分析から制限があるサンプルにわたり、高いタンパク質およびペプチドの同定数を実現します。
PepSep® Classic 25 cm x 150 μm x 1.5 μm: より深く、より広く、より迅速にプロテオミクスを実現
コアラボやアカデミックラボでは、より深いカバレッジ、より高いスループット、そしてより優れた同定数を実現するために、あらゆるアプリケーションに対応する単一のカラムソリューションを求めています。
PepSep® Classic（25 cm x 150 µm x 1.5 µm）は、装置性能の向上に貢献し、PASEF® 高速スキャンスピードでのサンプルスループットと高い4D感度の両方を自由に実現し、未知の領域を深く掘り下げ、プラズマプロテオームの可能性を切り開くことを可能にします。
PepSep® Classic 25 cm x 150 μm x 1.5 μm:
4D感度の向上がもたらす優れた性能
PepSep XTREME C18 HPLCカラムは、短いグラジエントと高いスループットのどちらかを選択するのではなく両方とも提供します。より優れたカバレッジ、高スループット、高感度、高い再現性でプロテオミクス分析を向上させる時が来ました。PepSep XTREMEとtimsTOF Pro 2を組み合わせると30分のグラジエントで5,500以上のタンパク質グループ、42,000以上のペプチドという、これまでにない高深度プロテオミクスを実現できます。
PepSep® Classic 10 cm x 150 μm x 1.5 μm:
Advancing Proteomics Research
科学者たちは、血漿プロテオームの解析において、より広いカバレッジとより高いスループットを達成するために、手法の微調整に時間を費やしています。
PepSep® Classic 10 cm x 150 µm x 1.5 µmは、装置性能を向上させ、分析を促進します。timsTOF HTと組み合わせることで、4D-プロテオミクスに専念し、PASEF® のスピードでハイスループットに1000サンプルを正確に分析することができます
より多くのサンプルを、より短時間で、より高い再現性で分析
プロテオミクスでは、価値のある豊富な意味のある豊富なデータを取得するためにハイスループットが要求されます。PepSep® Classic 10 cm x 150 μm x 1.5 μm カラムは、そのためのお手伝いをします。今こそHPLCの能力を向上させる時です。
PepSep ULTRAカラムはペプチドやタンパク質の同定、特性解析、そして定量を行います。優れた再現性を持ち、一般的な主要なカラムと比較してを最大2倍またはそれ以上長持ちさせることができます。
" 当初は、Bruker timsTOF Pro質量分析計のみにPepSepカラムを使用していました。しかしその性能と手頃な価格に感心し今ではラボのすべての装置でPepSepカラムを使用しています。
このカラムは、最高のクロマトグラフィーでありながら、背圧を最小限に抑えるというスイートスポットを見事に突いています。従来のナノスプレーカラムと比較すると、より高い流速で使用でき、LCのオーバーヘッド時間を最小にできます。これはスループット、特に短いグラディエントを用いた数千のサンプル処理に極めて重要なことでした。 "
Danielle Swaney, Assistant Professor, Cellular Molecular Pharmacology, University of California, San Francisco, USA
パフォーマンスとシンプルの融合
プラグ・アンド・プレイですぐに使用できるエミッターには、カラム接続用ユニオンとスプレー用チップが付属しており、CaptiveSprayのセットアップに手間がかかりません。
PepSep™エミッターは、2つのIDが用意されており、プロテオミクスアプリケーション特有の要求に対応します。すべてのCaptiveSprayソースと互換性があります。
Literature
- PepSep Consumables Brochure - Everything you need for your standard and advanced proteomics workflows
- Brochure Bruker LCMS Consumables
- Brochure Bruker Customer Portal FAQ
- Instructions for Use: PepSep Columns en, Revision A; 06-2022 (1842619, 1842621, 1866154, 1893470-485, 1893625-627, 1895616-619, 1895797-852)
研究用にのみ使用できます。臨床診断には使用できません。