红茶代谢产物可从尿液中提取，以避免从头合成

“通过结合SPE与样品净化，利用制备LC柱（与MS联用）和随后的纯化进行分馏，可从尿液中制备分离多酚代谢产物的尿代谢产物。”

茶是世界上最受欢迎的饮料之一。据称它能提供一系列令人印象深刻的健康益处，包括改善心血管健康、降低空腹血糖水平、降低癌症风险、松弛气道以及改善消化。此外，它还具有抗氧化、抗菌和消除压力的特性。

由于茶多酚的直接生物利用度较低，人们认为茶的有益特性是来自易于进入循环的代谢物所产生的影响。尤其是多酚代谢物已被确定为提供茶的健康益处的候选对象。共轭缬内酯是红茶多酚分解代谢的最早产物，它与一系列器官的特定相互作用被认为是潜在的作用方式。

由于难以分离出用于研究的多酚代谢物，因此，对引起茶多酚代谢物积极作用的确切作用机制的澄清受到了阻碍。为方便茶多酚代谢产物的制备，对茶多酚代谢产物进行结构解析和体外生物活性评价，近年来已开发出一种新的提取工艺。

利用固相萃取-制备液相色谱-质谱（MS）-液相色谱-MS-核磁共振（NMR）工作流，从红茶消费者的尿液中分离出儿茶素基多酚的共轭缬内酯代谢物。

利用Bruker MicrOTOF II质谱仪，通过MS引导采集从制备液相色谱分离中获得的共轭缬内酯。使用装有5-mm低温探针的Bruker Avance III 600 NMR波谱仪，通过1D、1H和13C NMR对所得化合物进行鉴定和定量分析。

NMR波谱显示，5种共轭缬内酯代谢物的含量为8-160μg，纯度为70-91%。

在分离前使用固相萃取对尿液和代谢物浓度进行清理，有效去除半极性代谢物的高背景水平，并且使用制备LC柱代替分析柱，显著缩短了分离出足够的代谢物进行NMR分析所需的时间。

因此，新的工作流程适用于分离在尿液等复杂生物流体中产生的亚μm浓度代谢物。它为茶代谢物的繁琐和昂贵的从头合成提供了一种经济有效且简便的替代方法，这将增加这些化合物在生物活性分析中的研究，或作为质谱定量的真实分析标准的可用性。

更多信息，请联系Bruker公司。

来源：

De Roo N等；“利用SPE‐ prepLC–MS–LC–MS‐NMR工作流对红茶消费者尿液中分离出的共轭缬内酯代谢物进行全1H和13C NMR波谱分析”；MagnReson Chem. 2019;1–10. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/mrc.4833